Вы будете вакцинироваться?

-aleex-

Точно, единица измерения - коэффициент позитивности Smile

Степень окраски теста чтоль? А так ладно, качественный и качественный, суть понятна, но динамику не отследить.

ard

gavrick

Highlander

А смысл? Проверить наличие антител, удостовериться что вакцина подействовала?

XAPuTOH

Не стал ждать звонка. записался на завтра в другую поликлинику.

gavrick

and108

Ща говорят две недели как записались, и тишина...Очереди? Или вакцины нет?

Highlander

Моей маме обещали позвонить, не дождалась, сегодня просто пошла в поликлинику, укололи без проблем

Gray Ural

Отсюда https://www.facebook.com/igor.sokolov.1048/posts/3693917260685454
COVID-19: подробно про антитела.
Эта публикация – детальный разбор видов антител, динамики их образования и диагностических подходов в идентификации коронавирусной инфекции. Я хочу отдельно и подробно остановиться на этом важном анализе, поскольку постоянно встречаюсь с неверной (или неглубокой) интерпретацией лабораторных данных.
Дисклеймер: у меня нет конфликта интересов ни с одной из нижеуказанных компаний и лабораторий. Я крайне признателен им в предоставлении детальной информации по их тестам. И да, повторю - использование этого материала в СМИ должно быть согласовано с автором.
Понимание известных сторон антительного ответа, соответствующая интерпретация показателей имеют огромное значение в осознании того, что происходит. Уже устал повторять – не сдавайте анализы на антитела в первые дни болезни, и определение антител класса А тоже не поможет…
Начну с простой характеристики - есть разные антитела, имеющие прямое отношение к инфекционному процессу, включая коронавирус, – антитела класса M, G, A. (в контексте общего представления надо упомянуть об антителах класса E, тесно связанных с аллергическими реакциями, и антителах D, участвующих в переговорах между клетками и др, но мы сконцентрируемся на первых трех, как имеющих самое важное влияние). Все они представляют из себя белки, это глобулины. Поскольку эти белки задействованы в иммунологических реакциях, то их называют иммуноглобулины, Ig. Учитывая то, что определение уровня антител класса M и G включено даже в противоэпидемические мероприятия (большие показатели антител класса М раньше служили поводом для карантина), то эти буквы знакомы уже всем. Однако, посмотрим на них ближе.
Если организм встречается с инфекцией, то очередность (динамика) продукции антител в классическом варианте выглядит так: IgM -> IgG -> IgA. Это имеет свою логику: в начале заболевания происходит изучение инфекции и то, как ее можно нейтрализовать. Организм подбирает ключики для того, чтобы открыть замки «врага», настраивается точнее и точнее. В иммунологии есть понятие авидности, иными словами – прочности связи антитела с антигеном, с инфекцией (понятно, что чем крепче ты держишь кого-то, тем меньше шансов ему убежать… Но я, к примеру, Федора Емельяненко не удержу, авидность не та). Поэтому организм изначально делает по-другому – вместо точной подстройки антитела к конкретному антигену, а вернее, к конкретному месту (это место молекулярные биологи называют словом ЭПИТОП), он делает антитела с 5-ю парой рук. Впятером держать одного – гораздо выгодней. Это и есть антитела М, они представлены пентамером с 5 активными центрами. Иными словами, антитела М весьма непрочно держат инфекцию, но у них 5 пар «рук». Поэтому общая «связанность» инфекционного агента (далее я буду говорить только про вирус) – неплохая.
Однако, проходит время, и организм начинает подбирать ключик к замочку вируса (к эпитопу вируса) очень точно, сила захвата растет, надобность в маломощных антителах M отпадает. Человек переключается на синтез G. Они точнее и крепче связывают антитело и эпитоп (конкретное место) вируса.
Интересная история с антителами класса А. Это секреторные антитела, которые способны выходить на поверхность слизистых оболочек (носа, бронхов, кишечника) и активно противостоять инфекции уже в месте внедрения. Им требуется примерно такое же время, как и антителам G, для настройки. Они также присутствуют и в крови, при этом у них есть одна особенность – они могут проходить через эпителиальную выстилку на поверхность слизистых.
При этом динамика продукции антител А и G различна для разных заболеваний – когда-то раньше начинают продуцироваться А (M -> A -> G), когда-то G (M -> G -> A). Однако, антитела класса М появляются все-равно первыми - к 4-5 дню болезни, достигая максимума к 7-10 дню и падая уже с 14-16 дня. Обычно, к 30 дню заболевания их не определяют в крови. В то время как G и А к 7-10-дню только стартуют, к 14-18 должны показать максимум и остаться в крови очень долго, особенно G (в некоторых случаях, мононуклеоз например – антитела класса G останутся пожизненно).
Но с коронавирусом – все не как у людей. И динамика здесь абсолютно другая, в чем я убедился, внимательно изучив работы авторов диагностических систем при разработке своих тестов. Изначально все внимание было приковано к антителам класса М и G, как наиболее значимым в диагностике, и рассмотрению динамики для будущего тестирования: до 7 дня слабое определение IgM, быстрый рост к 12 дню и определение значимых количеств антител G с 14 дня заболевания (все дни указаны относительно первых симптомов болезни).
https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC7118534/
https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/32213337/
https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC7188146/
https://www.medrxiv.org/.../2020.03.02.20030189v1.full.pdf
К примеру, компания ABBOTT (США) еще в июне 2020 года вывела на рынок очень достоверные тесты на IgG, с 17 дня показывающие 100% чувствительность. Это – прекрасный результат. Но - только с 17 дня, раньше можно получить неверный ответ:
https://vademec.ru/.../abbott-vyvel-na-rossiyskiy-rynok.../
Казалось бы – никаких сюрпризов. Но вот дальнейший анализ дает интересные детали. Все антитела при коронавирусной инфекции, независимо от класса, и М, и G, и А начинают синтезироваться почти одновременно(!), на 4-5 день болезни. И оказалось, что уровень антител А рос значительно быстрее ранних М и на 6 день (!) становится положительным при тестировании, значительно превышая концентрацию антител М класса. Первичные выводы, которые можно делать по результатам исследований:
1. До 6-го дня болезни вероятность положительного результата ЛЮБОГО теста на антитела призрачно мала. Поэтому в качестве диагностики должны применяться ПЦР и антигенные тесты. Не надо до 6 дня болезни анализировать кровь на антитела…
2. С 6-го дня прогрессивно растет вероятность определения антител класса А (! и это важно), антитела класса М тоже растут, но значительно в меньшем титре. Вероятность положительного результат в промежуток 6-12 дней от начала болезни выше по тесту на антитела А. Поэтому, если вы хотите подтвердить болезнь ранним анализом крови, то Ваш выбор – антитела А, которые на 7 сутки заболевания дает правильную оценку у 75% заболевших, увеличиваясь к 100% на 10-12 день.
3. С 12 по 21 день болезни будут определяться и М, и А, и G, но тут есть особенности, на которых остановлюсь подробнее чуть позже.
https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC7331804/
http://euroimmun.ru/.../Padoan-Plebani_082020_IgA-Ab...
https://www.biorxiv.org/.../10.1101/2020.11.03.367391v1.full
http://www.analytica.ru/.../analytica-covid19-diagnost.pdf
Далее, антитела класса М при коронавирусе могут оставаться в крови до 2 месяцев (!), и это зарегистрировано. Более того, данные из практической деятельности и сбор информации по лабораториям говорят о циркуляции до 4 и более месяцев. Поэтому не удивляйтесь, что у некоторых (не у всех) антитела этого класса определяются весьма продолжительное время. Это не является никаким признаком болезни или основанием для карантина.
И теперь несколько критически важных понятий. Для большинства людей антитела в крови – это некое неразрывное понятие: они есть или нет. К примеру: определяя антитела к коронавирусу, мы хотим удостовериться - они у нас есть, а если есть, то какие - IgM или IgG? Это, по идее, должно нам сказать - переболел ли я и как давно. Определить антитела можно как качественными анализами, т.е. ответ лаборатории будет выглядеть: «обнаружено» / «не обнаружено», так и методиками с подсчетом количества(или полуколичества), там будут референсные цифры сравнения (например, 1.1 или 10). Выше референсной цифры – результат положительный, ниже – отрицательный (часто есть и переходная, сомнительная зона). Многие пациенты даже хотят сравнить воображаемый уровень антител между различными тест-системами. Этого нельзя сделать в принципе. И вот почему.
Приходя в лабораторию, мы мало обращаем внимание на конкретную тест систему проверки антител. Сейчас большинство лабораторий в Москве работают на анализаторах ВЕКТОР-БЕСТ (Новосибирск), ABBOTT (США, Нидерланды), LIAISON (Италия), ROCHE (Швейцария), EUROIMMUN (Германия), ЛИТЕХ (Россия) и некоторых других системах. И даже единицы измерения там разные: КП – коэффициент позитивности, ОЕ – относительные единицы и тд. Дело в том, что границу полуколичественного или количественного анализа каждый производитель определяет самостоятельно: тест-систему апробируют на заведомо положительных носителях антител и заведомо тех, кто их не имеет. При этом, как определяют порог срабатывания – по прохождению светового потока, разведением раствора, интенсивностью свечения – это личное дело разработчика. Поэтому, к примеру, уровень антител 5 в тесте ВЕКТОР-БЕСТ и 5 в тесте ABBOTT – это абсолютно разные уровни: первые могут быть получены на просвет и 5 - это величина темного фильтра, а вторые, к примеру, разведением и 5 - это величина разведения. Это, как килограммы и метры. Не переводите единицы измерения между РАЗНЫМИ системами.
Хотите сравнить? Тогда делайте анализ на одной и той же системе. Существует объективное мнение, что полуколичественный анализ, относительная цифра, полученная в нем - не может отражать даже сравнительную оценку уровня антител в одной и той же системе, например Abbott Architect. Поскольку существует разброс показателей от анализа к анализу, даже для одного забора крови. Тем не менее, подтверждения этому я не нашел. В сертификационных документах многих ИФА-систем отражено - число полуколичественного анализа косвенно отражает количество антител в исследуемом материале. А если анализ делается количественной методикой (Liaison, Италия или Roche, Швейцария и др.), то там цифры явно отражают концентрацию антител у человека.
И наконец – самое сложное. Антитела одного и того же класса (к примеру, G) – это не единый конгломерат. Антитела вырабатываются на разные участки вируса – антитела к шиповидному белку S, антитела к нуклеопротеиду N, антитела к матриксу и тд. Нам важно понять, какие из них наиболее важные и полезные. И все исследования сейчас сосредоточены на 2 существенных разновидностях антител – к шиповидному белку S и нуклеопротеиду N. Объясняется это просто:
1. Антитела к шиповидному белку S очень важны для быстрой нейтрализации вируса и вот почему: именно этим шипом вирус цепляется за определенное место на поверхности клетки человека (ACE2 рецептор) и потом инфицирует ее. Не чем-то, а именно шипом осуществляется первичный контакт. Значит, связав шипы вируса антителами, мы, фактически, будем иметь вирус без... возможности проникновения в клетку. Шипы крепко связаны и сам вирус будет вскоре уничтожен клетками-пожирателями нашего организма (макрофаги, киллеры и др). Вот этот нейтрализующий иммунитет в виде антител к S белку нас очень интересует. Он защищает нас сразу. Небольшая подробность: у шиповидного белка S есть 3 принципиальные зоны: эпитоп(зона) S2, это стебелек шипа, эпитоп S1, это верхняя часть, бутон шипа и зона RBD (по –английски RBD, receptor binding domen, по-русски РСД - Рецептор связывающий домен). Представьте (аналогия весьма уместная) - бутон распускается и внутри - зона RBD, именно этой зоной происходит контакт вируса и человеческой клетки. И антитела (хоть и к S-белку) у нас образуются разные: к области S2, S1, RBD. Теперь, наверное, понятно, что САМЫЕ эффективные и САМЫЕ нейтрализующие - это антитела к областям RBD и S1.
2. Если антитела вырабатываются к нуклеопротеиду N (а он расположен внутри вируса), то возникает парадоксальная ситуация. Эти антитела выглядят бесполезными, ведь чтобы атаковать вирус им надо добраться до его «внутренностей», а это, при целом вирусе, невозможно. Тем не менее, организм продуцирует много анти-N антител, зачем? Недавние исследования проливают свет: оказывается, что уровень этих антител может косвенно указывать на активацию клеточного иммунитета. И, хоть сами эти антитела не столь полезны, как нейтрализующие RBD к примеру, но они сообщают, что курок клеточного иммунитета возможно взведен, а там защита на годы…
https://www.sciencedirect.com/.../pii/S1074761320304477
Не правда ли – запутано получается: разные классы антител, по разному во времени продуцируются, да они еще и разные даже в пределах одного класса. IgG, к примеру сделанный для RBD, это совсем не то, что IgG для S2 эпитопа, а IgG к нуклеопротеину N – так это... как сравнить Эйфелеву башню и ледокол. Но они все IgG… И ответ из лаборатории выглядит, как IgG в титре 18 ОЕ, или КП, или Е. Никто же вам не говорит - а собственно к чему это IgG? Или более просто(забегая вперед) - отсутствие IgG к коронавирусу в конкретной лаборатории - АБСОЛЮТНО не говорит о том, что болезни не было. Ведь лаборатории работают с конкретными антителами, конкретными классами, а пациент сдает тест в определенную фазу болезни, когда их уже или еще нет. Все 3 фактора могут привести к тому, что хоть болезнь и прошла достаточно сложно, а антитела – не определяются… А у человека со слабыми симптомами болезни – уровень каких-то антител зашкаливает.
Как же так? Теперь становится понятным – лаборатория, которая работает с конкретным аппаратом тестирования и определением конкретного антитела, совсем просто может не определить то, что есть у человека в крови на данный момент. К примеру:
Вы сдаете тест на антитела М и G на системе ВЕКТОР-БЕСТ. На… 14-18 день заболевания средней тяжести (все по инструкции). Ожидая получить малюсенькие М и хорошую концентрацию G. А в ответ получаете: большие М и отсутствие (маленький) G. Удивлены? Все это спокойно объясняется -смотрим на что именно (на какие антитела) настроена система Вектор-Бест.
Из характеристик, предоставленных компанией: «В наборе для выявления IgM, основанным на методе «захвата», используется смесь меченных пероксидазой хрена белков — нуклеокапсида и RBD-участка Spike.» Переведем на уже понятный нам язык – компания определяет смесь антител М к N-белку и Рецептор Связывающему Домену (RBD). (смесь – для повышения достоверности, или те, или те антитела должны быть). Но(!) ситуация может развиваться так: организм начал продуцировать антитела к RBD эпитопу (а так и происходит чаще всего), и чуть позже отреагировал продукцией антител к внутреннему N-белку (она чуть запаздывает) - мы на 21 день болезни будем иметь внушительную цифру по М (хотя рассчитывали получить маленькую)… Хорошо, с М понятно, а почему G отрицательные после болезни?
Возвращаемся к ВЕКТОР-БЕСТ: «Для наборов, предназначенных для выявления IgG, IgA … был выбран полноразмерный белок S, так как он содержит большее число иммунодоминантных эпитопов». А у нас идет продукция к N-белку и к зоне RBD, которая внутри закрытого букета S-белка... Мы будем иметь 0. Даже если часть букетов окажутся распущенными (и зона RBD станет доступной), то концентрации RBD антител может не хватит для положительного анализа к полноразмерному спайку на 14-18 и даже 21 день.
Или второй вариант: а если полноценный ответ у больного только на N-белок (вероятность меньше, но все же)? Ведь ABBOTT, к примеру, использует только N-белок для анализа антител… и с 17 дня дает 100% чувствительность. Понятно, что если в крови СЕЙЧАС вертятся только антитела к N, то Вектор-Бест тоже даст 0 по IgG, не соответствующий действительности… Иными словами – в обоих случаях мы в Африке пытаемся найти китайца… Они есть, только дадут «минус» по конкретному результату. Но через неделю-две, переболевший окажется в Китае и поиск китайца – не составит труда.
Тут вот и оказывается, Что ДАЛЕКО недостаточно знать про М и G, надо еще понимать с какими антителами работают ведущие лаборатории, какой у меня день болезни и что я получу в результате. Я проанализировал несколько ведущих производителей (все ведущие лаборатории работают с ними: Инвитро, Гемотест, KDL, CMD и тд), вот они:
1. Система ВЕКТОР-БЕСТ (Новосибирск):
IgM > работают на анализ антител к RBD и N-белку.
IgA и G > полноразмерный S белок. (тест системы от ВЕКТОР-БЕСТ на IgA не представлены на коммерческом рынке использования, мне это объяснить сложно, но в документах их характеристики заявлены. Повсеместно используются их тесты на IgM и IgG.)
2. Система ABBOTT (США):
IgM> определение только S белка (!)
IgG > определяют и работают только с N-белком.
3. Система EUROIMMUN (Германия):
IgM > смесь антигенов S и N-белок .
IgG и IgA > эпитоп S1.
4. Система DiaSorin LIAISON (Италия):
IgG > эпитопы S1 и S2.
5. Поликлиники - система Mindray (Китай)
IgM + IgG > оба тесты на нуклеокапсид и полноразмерный S
6. Система BECKMAN COULTER (США):
IgG > RBD спайк-белка.
7. Система ROCHE (Швейцария):
IgG > RBD спайк-белка.
8. ЛИТЕХ (Россия):
IgG > полноразмерный S белок.
Вы видите, что все анализы настроены на разные антитела не только по классу, но и по виду внутри класса. Поэтому вы запросто можете получить РАЗНЫЕ ответы на анализ, сданный в один и тот же день в разных лабораториях.
Попробую дать максимально полезные советы.
1. С огромной вероятностью в первые 6 дней результат ЛЮБОГО теста будет отрицательный. Не сдавайте кровь на тестирование к антителам в промежутке 1-6 дней заболевания.
2. Если Вы хотите убедиться в наличии антител в ранний период (8-21день) – ваш выбор система EUROIMMUN (Германия) и конкретно антитела А (IgA).
3. Если Вы хотите убедиться в продукции антител на 21 день и ДАЛЕЕ (на 28 день при малосимптомной форме)– ваш выбор система DiaSorin LIAISON(Италия), или BECKMAN COULTER (США), или ВЕКТОР-БЕСТ (Новосибирск): IgG. Их количество очень коррелирует с напряженностью защиты антителами на 4-6 мес. В случае отрицательных анализов обязательна пересдача на системе ABBOTT (США): IgG.
4. Если вы хотите понять понять - а может и клеточный иммунитет включился? - это система ABBOTT (США): IgG. Это – косвенный признак его активации, причем уровень антител при этом – совсем не важен (но тест должен быть положительным!). При этом если у вас была симптоматическая форма болезни и IgG к S-белку тоже есть - то вероятность включения клеточного иммунитета очень и очень высока (это в контексте вакцинации).
5. Если вы тестируетесь, а вдруг УЖЕ переболел? - рекомендую использовать максимальную СМЕСЬ эпитопов, а это одновременный анализ на системах DiaSorin Liaison (или ВЕКТОР-БЕСТ) и ABBOTT: IgG. Можно так же использовать комплексные анализы, предлагаемые рядом компаний, например МЕДСИ:
https://medsi.ru/.../summarnyy-test-na-antitela-iga-igm-i...
6. Если вы хотите посмотреть «остаточную напряженность» иммунитета после болезни: система EUROIMMUN (Германия): IgG или LIAISON (Италия): IgG или ВЕКТОР-БЕСТ: IgG.
7. Участники 3-фазы вакцинации Спутником-V: в вашей вакцине заложен S-белок (шип коронавируса), поэтому для вас выбор: IgG на тест системах LIAISON, BECKMAN COULTER, ROCHE, EUROIMMUN и ВЕКТОР-БЕСТ. Но не ABBOTT(!) и по отзывам участников пк система Mindray плохо коррелирует с предпочитаемым всеми вариантом Diasorin Liaison...
Это оптимальные выборы, но абсолютно не значит, что других вариантов нет… (только зарегистрированных тестов ~200). И наконец, последнее и важное. Наш организм весьма умное творение, появляются данные, что в некоторых случаях, он может оставить вирус у себя. Непонятно для чего, непонятно это персистенция или что-то иное, но есть 2 удивительных факта.
1. Вирус обнаружен в кишечнике человека, спустя длительное время (несколько месяцев) после инфицирования. Он не размножается, «жив» он или нет – вопрос философский, но выглядит, как цельные вирионы. В тюрьме ли он – пока непонятно.
2. В динамике наблюдается изменение и оттачивание устойчивости иммунного ответа у людей, где такая персистенция имеет место. Иными словами, организм не просто держит вирус, он изменяет и варьирует форму своего ответа по нему (!)
https://www.biorxiv.org/.../10.1101/2020.11.03.367391v1.full
Для чего я это пишу? Напряженность ответа «сейчас» определяется нейтрализующими антителами - к эпитопам S белка и RBD-области S1 бутона. Понятно, что они падают в течение 3-6-8 месяцев. Ну не могут все антитела в огромных количествах присутствовать постоянно. Но уже ясно, что организм делает все возможное, чтобы включить клеточный иммунитет на длительный (6-11 лет) срок. И пока у нас только косвенный показатель этого ответа – IgG к N-белку, и это – только система ABBOTT. Коммерческие тесты на клеточный иммунитет пока доступны только в исследовательских целях. У нас впереди - еще длительный и тернистый путь.